Amoxygard WS při léčbě drůbeže se salmonelózou, články NITA-FARM

Informujeme, že pro zjednodušení pochopení formy uvolňování práškových produktů NITA-FARM byly změněny názvy některých přípravků (WS – prášek rozpustný ve vodě, Feed – termostabilní krmné granule):

• Amoxigard WS (místo Amoxigard Feed)
• Doxilox WS (místo Doxilox Feed)

Autoři článku:

Balyshev A. V., kandidát biologických věd, vedoucí vědecký pracovník Všeruského výzkumného ústavu základní a aplikované parazitologie zvířat a rostlin pojmenovaný po K. I. Scriabin

Abramov S. V., kandidát veterinárních věd, vedoucí vědecký pracovník Všeruského výzkumného ústavu parazitologie pojmenovaného po K. I. Skrjabinovi

Kashkovskaya L. M., kandidátka veterinárních věd, vedoucí výzkumná pracovnice společnosti NITA-FARM Company

Šafářová M. I., kandidátka chemických věd, vedoucí výzkumná pracovnice skupiny pro vývoj produktů společnosti NITA-FARM

Bakteriózy (kolibacilóza, salmonelóza, stafylokokové a streptokokové infekce) zaujímají jedno z předních míst v patologii drůbeže. Jejich přítomnost na farmě vede k masivní úhynu hospodářských zvířat (až 70 %) v akutním nebo subakutním průběhu onemocnění. Chronické, pomalé infekce vedou k nerovnoměrnému nebo nízkému přírůstku tělesné hmotnosti u brojlerů, nízké konverzi krmiva, zvýšené citlivosti na stres, snížení produkce vajec a líhnivosti kuřat, zhoršení biologických vlastností embryí a poklesu postvakcinační antivirové imunity.

Je známo, že boj proti bakteriálním infekcím by měl být založen na souboru opatření: zootechnických, veterinárních a hygienických, protiepizootických a chemoterapeutických. Vzhledem k obtížné epizootické situaci na drůbežích farmách ohledně infekční patologie mají chemoterapeutika včetně antibiotik velký význam a odmítnutí jejich použití v produkčních podmínkách je v současné době nemožné [12]. Na druhou stranu dlouhá historie používání antibiotik ve veterinární medicíně a medicíně vedla k dalšímu problému – rozvoji rezistence patogenů k řadě z nich. To platí také pro cefalosporinové léky a fluorochinolony (zejména enrofloxacin), které jsou široce používány v chovu drůbeže. Proto je velmi důležité hledat prostředky, které jsou účinné proti širokému spektru bakteriálních kmenů, které ztratily citlivost na léky, které se v drůbežářství používají již dlouhou dobu.

Praxe ukazuje, že nejúčinnější jsou komplexní léky na bázi vysoce aktivních moderních látek, jejichž kombinace poskytuje synergický efekt a široké spektrum mikroflóry citlivé na lék [1, 4, 6].

Účelem této práce je zhodnotit terapeutickou účinnost nového antibakteriálního léku Amoxigard WS od tuzemské společnosti NITA-PHARM.

Amoxigard WS je širokospektrální antibiotikum na bázi amoxicilinu, chráněné kyselinou klavulanovou, ve formě prášku k perorálnímu podání. Lék je předepsán k léčbě pacientů s bakteriálními infekcemi u prasat a drůbeže.

Materiály a metody

Experiment byl proveden ve dvou fázích. V první fázi byly farmakokinetické parametry Amoxigardu WS stanoveny na 18 kuřatech křížence Smena-7 ve věku 30 – 32 dnů o hmotnosti 1,5 – 1,7 kg. Ptáci účastnící se experimentu byli chováni ve standardních farmářských podmínkách, předtím jim nebyla podávána žádná chemoterapeutika a byli klinicky zdraví. Pro přesné dávkování Amoxigardu WS byla všechna kuřata předem zvážena a byla vypočtena individuální dávka. Léčivo bylo kuřatům podáváno jednorázově perorálně v dávce 40 mg na 1 kg tělesné hmotnosti, což odpovídá 20 mg trihydrátu amoxicilinu a 5 mg kyseliny klavulanové na 1 kg tělesné hmotnosti. Vzorky krve byly odebrány před (0 hodin) a po aplikaci léku, o 10 hodin později; 15; 30 minut a 1; 1,5; 2; 4; 6; 8; 12 hodin. Obsah amoxicilinu a kyseliny klavulanové v krevním séru ptáků byl stanoven vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s tandemovou hmotnostní spektrometrickou detekcí (HPLC-MS/MS).

Ve druhé fázi byla hodnocena terapeutická účinnost Amoxigardu WS na brojlerech ve věku 14–21 dní, křížence Ross 308, s diagnózou salmonelózy na jedné z drůbežích farem v Moskevské oblasti. Na principu analogů byly z nemocných ptáků vytvořeny experimentální a kontrolní skupiny po 50 kusech.

Diagnóza byla stanovena na základě klinických příznaků, patologických a mikrobiologických studií s přihlédnutím k epizootické situaci na farmě. Bakteriologické testování zahrnovalo mikroskopii krevních nátěrů a parenchymálních orgánů, izolaci čisté kultury a biotest ke stanovení virulence patogenu. Studium morfologických a kulturních vlastností a identifikace izolovaných mikroorganismů byly prováděny metodami obecně akceptovanými v mikrobiologii [3, 11].

V experimentální skupině byl Amoxigard WS použit jako specifická terapie perorálně skupinovým způsobem po dobu 3–5 dnů (v závislosti na dynamice rekonvalescence) s pitnou vodou v dávce 4 g na 100 kg hmotnosti ptáka. Léčivý roztok byl připraven v množství 30 g léčiva na 100 litrů vody v objemu vypočteném pro spotřebu ptáky během dne. Kuřata v kontrolní skupině byla léčena obdobným importovaným lékem dle návodu (perorálně s pitnou vodou v denní dávce 4 g na 100 kg ž.hm. po dobu 3 až 5 dnů v závislosti na dynamice rekonvalescence). Každý den byly připravovány nové roztoky léků.

Pták byl během experimentu pozorován po dobu 7 dnů. Její tělesná teplota byla měřena selektivně ve skupinách před léčbou (1. den experimentu) a 7. den experimentu. Funkční stav těla kuřat byl hodnocen pomocí hematologických parametrů. Za tímto účelem byly vzorky krve odebírány ráno nalačno 1. a 7. den experimentu (před zahájením léčby a po 7 dnech). Pro obecnou klinickou analýzu byly do zkumavek s K3EDTA odebrány objemy krve 3,5–3 ml. Při výpočtu leukocytárního vzorce byly krevní nátěry barveny podle Romanovského-Giemsy pomocí soupravy pro fixaci a barvení přípravků pro hematologické a cytologické studie Haemocrafix (Rusko). Obarvené šmouhy byly pozorovány pod trinokulárním digitálním mikroskopem při 1000násobném zvětšení s imerzí.

Účinnost léčby byla hodnocena změnami v klinickém stavu ptáka, dobou zotavení, přítomností nebo nepřítomností úhynu v experimentální a kontrolní skupině, jakož i poměrem uzdravených a nemocných jedinců, vyjádřený v procentech. Pták, který neměl 7. den experimentu žádné klinické příznaky onemocnění a měl hematologické parametry v rámci normativních hodnot, byl považován za zdravého.

Pro všechna data byly vypočteny průměry a standardní chyba průměru a uvedeny v tabulkách.

Výsledky výzkumu a diskuse

Údaje z farmakokinetické studie přípravku Amoxigard WS ukázaly, že obě složky léčiva se vstřebávají z gastrointestinálního traktu do krve během 0,5 – 1,0 hodiny a poté se také rychle distribuují do tkání a zadržují se v nich po dobu nejméně 12 hodin, čímž poskytují baktericidní a terapeutický účinek. Četné experimenty farmakokinetiky a účinnosti léků na bázi amoxicilinu a kyseliny klavulanové potvrzují výsledky této studie [2, 5]. Jiní autoři potvrzují vysokou antimikrobiální aktivitu β-laktamů proti izolátům terénních kmenů stafylokoků [7, 10].

Před zahájením léčebných opatření byl zaznamenán jasný klinický obraz salmonelózy u ptáků obou skupin: serózně-hnisavá konjunktivitida; nejistá chůze; kuřata více seděla a pohybovala se s obtížemi; mukopurulentní výtok z nosu, zvýšená tělesná teplota (42,65±0,30 0C v kontrolní skupině a 42,49±0,18 0C v experimentální skupině); průjem. U některých jedinců byl pozorován zápal plic, dýchací potíže a sípání. Kuřata také vykazovala sníženou chuť k jídlu a zpomalený růst a vývoj.

Při pitvách uhynulých ptáků byla zjištěna nekróza sliznice céka s fibrinózními usazeninami na jeho povrchu. Sliznice žlučníku je oteklá, hyperemická, žlučník je vyplněn tmavě olivově zbarvenou žlučí smíchanou s fibrinem a hlenem. V hrudní dutině byl zaznamenán serózní výpotek smíchaný s fibrinovými vločkami. V plicích mají ohniska zhutnění šedo-červenou barvu. Na základě výsledků bakteriologické studie vnitřních orgánů uhynulých kuřat byly na farmě izolovány kultury S. enteritidis. V některých případech byly z patologického materiálu izolovány kromě Salmonelly i kultury Proteus vulgaris a Sterpococcus pyogenes.

Studie morfologického obrazu krve odhalila leukocytózu a zvýšení ESR v důsledku zvýšení množství globulinů, fibrinogenu a mukopolysacharidů, což je charakteristické pro zánětlivé procesy. Navíc byla pozorována relativní erytrocytóza na pozadí dehydratace (tabulka 1). Většina biochemických parametrů byla v mezích normy; byl zaznamenán pouze nárůst celkové bílkoviny, což také potvrdilo přítomnost zánětlivých procesů v těle ptáka (tabulka 2).

Morfologické krevní parametry brojlerových kuřat (n=5)