Alfa-amyláza, krevní a močový test pro domácí mazlíčky, kočky a psy №AN11AMY v Moskvě

Biochemická analýza stanovení alfa-amyláza v moči Provádí se při podezření na akutní zánět slinivky břišní a k posouzení účinnosti léčby akutní pankreatitidy.

Alfa amyláza — enzym, který zajišťuje štěpení komplexních sacharidů. Má dvě podoby: sliny (S) и slinivky břišní (P). Alfa-amyláza S je produkována především ve slinných žlázách. V menším množství je produkován také v játrech, plicích, střevech a vejcovodech. Alfa-amyláza P je produkována slinivkou břišní. Z těla se vylučuje ledvinami, proto se zjišťuje v moči. I když diagnostická hodnota v případě pankreatitidy je menší než při stanovení amylázy v krvi.

Amyláza v moči (diastáza) — je nepřímým ukazatelem obsahu amylázy v krvi a schopnosti ledvin vylučovat ji do moči.

Význam výzkumu

Při jakémkoli onemocnění slinivky břišní je produkce enzymu narušena. Pokud se amyláza běžně dostává v omezeném množství do krevního řečiště a moči, v případě onemocnění se její hladina v obou biologických tekutinách prudce zvyšuje. Tento stav je pozorován i v případech, kdy se klinické příznaky nerozvinuly do té míry, že pacient okamžitě vyhledal lékařskou pomoc. Studie proto může být provedena pro preventivní i terapeutické účely, aby se získaly následující informace:

• včasná detekce různých typů pankreatické patologie – pankreatitida, zablokování potrubí kamenem nebo nádorem, nekróza, mechanické poškození;
• posouzení zachování pankreatických funkcí;
• stanovení průchodnosti kanálků ze žlázy do dvanáctníku;
• identifikace příčin trávicí dysfunkce, protože enzym se aktivně podílí na zpracování potravinového bolusu;
• posouzení závažnosti již identifikované patologie, protože zvýšení enzymu v moči indikuje rozsah poškození a zánětu;
• posouzení zachování trávicí funkce na pozadí jakýchkoli patologií trávicího traktu a hepatobiliárního systému, protože sekrece enzymů může být narušena u jiných onemocnění;
• stanovení kvality prováděné léčby s cílem včas změnit typy léků nebo jejich dávkování a přejít k radikálnější taktice.

Je důležité si uvědomit, že testování hladin amylázy nepotvrdí konkrétní diagnózu. Je zaměřena na posouzení integrity funkce orgánu sekrecí enzymů. Ke komplexnímu posouzení onemocnění jsou proto nutné i další laboratorní a přístrojové testy. Diagnózu předepisuje endokrinolog, terapeut, gastroenterolog nebo jiný lékař, který má podezření na jakýkoli typ onemocnění slinivky břišní.

Proč je analýza nutná?

Při hodnocení stavu slinivky břišní po objevení se příznaků dysfunkce je předepsán soubor laboratorních testů. Jedním z nich je biochemický test na stanovení amylázy v moči. Při dešifrování získaných dat je důležité pamatovat na to, že hladina amylázy v krvi a moči je přibližně stejná, ale může zaostávat až o 10 hodin. Studie také zůstává spolehlivá po dobu 7-10 dnů, protože hladina enzymů v biologických tekutinách postupně klesá. Tyto informace se používají v následujících případech:

• diagnostika stavu slinivky břišní na pozadí vývoje jakýchkoli onemocnění;
• posouzení účinnosti dlouhodobé terapie, zejména pokud se léčí maligní novotvar;
• posouzení zachování filtrační kapacity ledvin v případě podezření nebo již zjištěné patologie v párovém orgánu (při snížení funkčnosti se zvýší hladina amylázy v krvi a v moči se sníží).

Obvykle jsou testy předepsány na onemocnění slinivky břišní, pokud pacient pociťuje bolest v oblasti břicha, hypertermii, prodloužené zvracení a ztrátu chuti k jídlu.

Indikace pro stanovení alfa-amylázy

Biochemický test moči na alfa-amylázu je předepsán pacientům s:

• patologie slinivky břišní (pankreatitida, trauma, obstrukce pankreatického kanálu, onkologie);
• perforovaný žaludeční vřed, akutní apendicitida, peritonitida;
• příušnice (zánět slinných žláz);
• cystická fibróza (poškození žláz vnější sekrece, závažné poškození respiračních funkcí);
• ukončení mimoděložního těhotenství;
• ketoacidóza (diabetes mellitus ve stadiu dekompenzace);
• akutní cholecystitida (zánět žlučníku);
• virové infekce;
• střevní obstrukce.

Jak sbírat moč na amylázu?

Moč na alfa-amylázu musí být odebrána do 24 hodin., po umytí vnějších genitálií. První část moči ráno by měla být spláchnuta do záchodu. Veškerá následná moč se shromažďuje během dne, v noci a druhý den ráno do čisté suché nádoby, která by měla být uložena v chladničce. Po odběru je nutné moč promíchat. Poté změřte objem moči v mililitrech a na referenčním formuláři uveďte dobu sběru.

Vlastnosti studie

Ke studiu hladiny amylázy v moči se používá kinetická kalorimetrická metoda. Test má následující vlastnosti:

• moč se používá jako biomateriál, ale nesbírá se jednou, ale v průběhu dne, aby bylo možné sledovat ukazatel v průběhu času;
• Při posuzování funkčnosti slinivky břišní je důležité současně vyšetřit hladinu amylázy v krvi a moči a také dodatečně stanovit lipázu;
• Nejlepší je podstoupit předběžnou přípravu na test, ale pokud je stav pacienta kritický, test se provádí bez něj;
• Dokončení studie trvá asi dva dny, při požadavku na citoanalýzu data dorazí během několika hodin;
• hladina amylázy v moči se vyšetřuje nejen při podezření na patologii pankreatu, ale také u mnoha dalších onemocnění trávicího traktu, hepatobiliárního a kardiovaskulárního systému;
• pro analýzu stačí shromáždit moč, nejsou potřeba žádné invazivní postupy, takže ji lze provádět často a identifikovat hladinu amylázy v dynamice (v akutním procesu je test předepsán každé 2-3 dny, v chronickém procesu – jednou za 1 měsíce);
• Pro diagnostiku se používá poloautomatický fotoelektrický kalorimetr, který vyhodnocuje hladinu látky o určité vlnové délce, získaná data jsou přesná a spolehlivá.

Po obdržení výsledků je důležité si uvědomit, že hladina amylázy se stanovuje v jednotkách za den, během kterého byl vzorek odebrán. Tímto způsobem bude lékař schopen sledovat produkci enzymu po celý den.

Metoda výzkumu

Po odebrání všech částí moči se celý vzorek promíchá a oddělí se od něj pouze střední část. To stačí ke stanovení koncentrace amylázy. Technika se provádí po etapách.

1. Přidání činidla. Část moči se nalije do jamek destičky a přidá se k ní činidlo. Mění barvu samotného roztoku a také interaguje s amylázou. Kontrolní vzorky se umístí do sousedních jamek, které budou použity k porovnání nalezených informací, aby se předešlo chybám.
2. Instalace laboratorní desky do analyzátoru. Fotokalorimetr přenáší světelné vlny, jejichž délka byla předem naprogramována laborantem. Tyto vlny se od amylázy odrážejí a zaznamenávají speciální senzor. Tímto způsobem je určena každá molekula amylázy, a proto je odhalena její přesná koncentrace.
3. Tisk dat. Na konci analýzy fotokalorimetr vytiskne hladinu amylázy v jednotkách za den a vykreslí se graf. To lékaři usnadní dešifrování dat.

Získané informace jsou předány pacientovi. Ve formuláři bude uvedena hladina jeho amylázy a také referenční hodnoty. Pokud jsou údaje mimo normální rozsah, měli byste kontaktovat svého lékaře. Pouze on vezme v úvahu obdržené informace, stejně jako anamnézu, příznaky, které se objevují, a další laboratorní a instrumentální testy.

Interpretace testu moči

Normální hladina amylázy v moči se pohybuje od 24 do 400 U/l.

Vysoká hladina amylázy v moči souvisí s jeho zvýšeným obsahem v krvi. Normálně se amyláza dostává do krevního řečiště, když určité procento pankreatických buněk přirozeně odumře. Pokud je zničení patologické povahy (pankreatitida), pak se do krve uvolní větší množství enzymu. V souladu s tím se více filtruje do moči. Kromě toho má zvýšení hladiny enzymu určitou charakteristickou dynamiku s maximem do 1 hodin a normalizací po několika dnech. To stojí za zmínku pankreatinkróza (masivní destrukce pankreatické tkáně s úplnou smrtí jejích buněk), nemusí dojít ke zvýšení hladiny alfa-amylázy, protože nebude se tvořit. V případě chronická pankreatitidazvýšení hladiny enzymu bude pozorováno pouze během období exacerbace.

Také amyláza je zvýšená při poranění břicha nebo operacích jeho orgánů, kdy nevyhnutelně dochází k podráždění slinivky břišní. Kromě toho se alfa-amyláza může zvýšit, když je pankreatický vývod zablokován kameny nebo stlačen nádorem. Může se také zvýšit při cholecystitidě, cholangitidě, zánětu pobřišnice, po dietních chybách nebo abúzu alkoholu. Hladina amylázy je také zvýšená při rakovině slinivky, vaječníků nebo plic, zánětlivých procesech pánevních orgánů a perforaci vředu.

Je třeba připomenout, že amylázu produkují i ​​některé další orgány. Proto jeho zvýšení v moči může mít také nepankreatické příčiny. Například v případě ukončení mimoděložního těhotenství je také možné zvýšení hladiny alfa-amylázy. Může se také zvýšit se zánětem slinných žláz. Při selhání ledvin může být množství alfa-amylázy vyloučené močí pokles, což bude prezentovat falešný obraz změny jeho úrovně.

Snížené hladiny alfa-amylázy stanovena u pankreatické nekrózy, rakoviny pankreatu, tyreotoxikózy.

Díky své malé molekulové hmotnosti (55000 60000-XNUMX XNUMX daltonů) je enzym filtrován do moči a vylučován z těla ledvinami. Stejně jako ostatní látky s malou molekulovou hmotností je reabsorbován v proximálních tubulech nefronu. Proto hyperprodukce jiných nízkomolekulárních látek soutěžících s amylázou o reabsorpci může vést k falešně nízkému výsledku testu.

Amyláza je enzym syntetizovaný ve slinivce břišní, slinných žlázách (kromě přežvýkavců a masožravců), duodenu, ledvinách, plicích a slezině. U psů a koček je tento enzym přítomen ve slinivce ve velmi vysokých koncentracích. Amyláza je vylučována v aktivní formě a hydrolyzuje komplexní sacharidy (škrob a glykogen) za vzniku maltózy a glukózy. Normálně je duodenální sliznice nejpravděpodobnějším zdrojem aktivity sérové ​​amylázy. Poločas rozpadu amylázy v krvi zdravých psů se pohybuje od jedné do pěti hodin.

Hlavním produktem štěpení sacharidů působením amylázy slinných žláz (ptialin) jsou dextriny (s průměrnou délkou řetězce 8-10 glukózových zbytků). Vlivem ptyalinu se také tvoří malá množství maltózy a maltotriózy. Optimální pH pro amylázu je 6,7, takže kyselá žaludeční šťáva inhibuje působení enzymu. Krátká doba, po kterou potrava zůstává v dutině ústní, nízká aktivita amylázy ve slinách a impregnace bolusu potravy žaludeční šťávou způsobují, že enzym pracuje krátce a neúčinně.

Amyláza se vylučuje z těla ledvinami. Enzym, který vstupuje do ultrafiltrátu ledvinovými glomeruly, je částečně resorbován a inaktivován epitelem renálních tubulů, v moči je detekována nevýznamná aktivita amylázy. Kupfferovy buňky v játrech jsou také schopné resorpce a inaktivace malých množství amylázy.

Příprava pacienta: Před studií musí být zvíře drženo na hladovění po dobu nejméně 12 hodin.

Způsob výběru: venepunkce.

Předanalýza:

· odběr krve – zkumavka s červeným uzávěrem s 2,5 ml gelu;

· zkumavku opatrně 6–8krát otočte;

· nechte zkumavku ve svislé poloze 30 minut při pokojové teplotě;

· centrifugujte při 3300 ot/min po dobu 10 minut, nejpozději do 60 minut po odběru;

· stabilita vzorku po dobu 3 dnů při +2 ℃…+8 ℃ (při skladování na gelu);

· Vyplňte formulář doporučení s uvedením kódu klienta;

· teplotní režim pro přepravu do laboratoře +2℃…+8℃ (modrý obal)

Výklad: Výsledky studie obsahují informace pouze pro lékaře. Diagnóza se provádí na základě komplexního posouzení různých ukazatelů, dalších informací a závisí na diagnostických metodách.

Stabilita vzorku: 1 měsíc při +2°С…+8°С (při skladování na gelu); 6 měsíců při -17°C. -23°C (pokud je nutné zmrazení, přeneste sérum do prázdné čisté zkumavky s bílým uzávěrem).

V případě sérové ​​lipémie (fyziologické nebo patologické) je možná inhibice aktivity amylázy.

Snížení rychlosti glomerulární filtrace (GFR) vede ke zvýšení sérových koncentrací amylázy. U psů a koček s onemocněním ledvin je pozorováno zvýšení enzymové aktivity 2,5krát nebo více. V důsledku prerenální azotemie může dojít ve větší míře ke zvýšení aktivity sérové ​​amylázy. Při selhání ledvin je pozorováno zvýšení aktivity amylázy nejen v krvi, ale také v moči v důsledku snížení tubulární reabsorpce.

Zvýšení aktivity sérových enzymů lze pozorovat při makroamylasémii, kdy amyláza v krvi tvoří sloučeniny s plazmatickými proteiny, často s protilátkami. Glomerulární filtrace těchto komplexů je obtížná vzhledem k jejich velikosti. Makroamylasémie je často přítomna u psů a ptáků s pankreatitidou, ale u koček je pozorována zřídka. Makroamylasémie představuje 5 až 62 % celkové amylázy a je zvýšená v séru psů s onemocněním ledvin a/nebo sníženou rychlostí glomerulární filtrace, a proto přispívá k hyperamylasémii zjištěné u onemocnění ledvin.

Degenerace acinárních buněk nebo obstrukce pankreatických vývodů způsobí, že amyláza se dostane do krevního řečiště. Čím vyšší je aktivita amylázy (7-10krát vyšší než normálně), tím větší je pravděpodobnost akutního onemocnění slinivky. Zvýšená aktivita tohoto enzymu v krvi psů je častěji spojována s pankreatitidou a stanovení jeho sérové ​​aktivity se používá jako screeningový test. Zvýšení aktivity amylázy v krevním séru 7-10krát nebo více při absenci selhání ledvin zpravidla naznačuje vývoj pankreatitidy. Po akutní pankreatitidě se hladiny amylázy zvyšují, vrcholí během 12-48 hodin a vracejí se k normálním hladinám během 8-14 dnů. Zvýšení hladiny enzymu o 3-4 krát je pozorováno u onemocnění jiných orgánů, které produkují amylázu, stejně jako při rozvoji diabetes mellitus, lymfosarkomu, hemangiosarkomu a poklesu GFR. Úroveň aktivity amylázy však neodráží závažnost poškození pankreatu. U psů zůstává v některých případech akutní pankreatitidy aktivita sérové ​​amylázy v normálních mezích. Senzitivita a specificita metody pro stanovení aktivity amylázy v diagnostice pankreatitidy u psů je tedy nízká a pohybuje se v rozmezí 63 až 77 %, resp. Při podezření na pankreatitidu by měla být současně stanovena hladina aktivity druhově specifické pankreatické lipázy v krvi.

Studium aktivity sérové ​​amylázy u koček je považováno za málo informativní metodu, zejména v diagnostice akutního poškození pankreatu. Hladiny enzymů obvykle zůstávají v normálních mezích.

Pokud má pacient zvýšenou aktivitu amylázy v krvi, je nutné provést další klinická vyšetření k vyloučení patologií jater, střev nebo stavů a ​​onemocnění snižujících GFR.

Přestože je alfa-amyláza zahrnuta v biochemických profilech koní, stanovení její aktivity u tohoto druhu má malou diagnostickou hodnotu.

O úroveň výš:

Obstrukce močových cest.

Nemoci nebo prasknutí střeva.

Užívání léků (glukokortikoidy).

O úroveň níže:

Nemá žádný klinický význam.

Formulář výsledku: kvantitativní.

Jednotky: U/l.

Referenční hodnoty:

Kočky: 350-2000 U/l.

Literární zdroje:

„Úplný průvodce laboratorním a instrumentálním výzkumem u psů a koček“, S. Vaden, D. Knoll, F. Smith, L. Tilley, „Akvárium“;

Veterinární hematologie a klinická chemie, Mary Anna Thrall, Glade Weiser, Robin W. Allison, Terry W. Campbell, WILEY-BLACKWELL;

Laboratorní profily nemocí malých zvířat, Charles H. Sodikoff, Mosby.

Koňská hematologie, cytologie a klinická chemie, druhé vydání. Editovali Raquel M. Walton, Rick L. Cowell a Amy C. Valenciano. 2021 John Wiley & Sons, Inc. Vydáno 2021 nakladatelstvím John Wiley & Sons, Inc.